作為人類蛋白質組中最為复(fu)雜的組分,血浆蛋白質(zhi)組具(ju)有極高的臨床轉化价值。血浆蛋白的豐度分布呈現明顯(xian)的不均(jun)匀特征,其中仅22種高豐度蛋白的含量就占比超過(guo)99%,而低豐度蛋白虽然占比少於1%,但在臨床(chuang)應用(yong)中卻占據重要地位。
基於“蛋白冠”及“Vorman 效應”,通過對納米磁珠進(jin)行特殊的表面修飾使其對血(xue)浆樣品的中、低豐度蛋白質具有更(geng)高的親和力,以達到非特异性去除高豐度蛋白質的目(mu)的,从而提(ti)高中、低豐度蛋白質的鉴定数。血清、脑脊液等(deng)含高豐(feng)度的體液樣本及小鼠、兔、羊等動物體液樣本同樣適用(yong)。
采用來自(zi)三位健康受試者的全(quan)血樣品,經EDTA抗凝處理获得(de)血浆后(hou),分別使用4種不(bu)同低豐度富集(ji)試剂盒進行處理,通過比较各(ge)試剂盒檢出的蛋白質总数來評估其富集(ji)性能表現,其中DMB試剂盒(he)在蛋白質檢出数量上表現明顯優於其他三(san)款產品。
01在人類血浆蛋白質組計劃(HPPP)数據库中檢索匹配的蛋(dan)白質共計(ji)2532個,其(qi)中動態範(fan)围跨越9個数量級,相比傳統檢(jian)測方法,中低豐(feng)度蛋白的鉴定数量(liang)實現了近13倍的顯著提升,大幅增強(qiang)了對血浆蛋(dan)白
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通過對鼠、兔、羊、牛等不同物種(zhong)的血浆蛋白(bai)組學研究工作,在蛋(dan)白質檢測與分析领域的深(shen)層探索中,相较(jiao)於富(fu)集前的原始樣本状態,血浆低豐度蛋白富集磁珠試剂盒这一工具的應用,可以將不同物種的蛋白檢出率提(ti)高3~
01相较於富集(ji)前(qian),富集后的人血浆樣本蛋白檢出(chu)率增加了8.5倍,脑脊(ji)液樣本以及尿液樣本蛋白(bai)檢出率提高了1.5倍,細(xi)胞上清液樣(yang)本蛋白檢出率提高了 3.5 倍。
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独特納米(mi)磁珠富集技術降低批次間結(jie)果差异
富集(ji)后血浆鉴定蛋白質種類超(chao)過 6000 種
ng/mL、pg/mL 浓度區(qu)間蛋白檢出效(xiao)果更顯著
不區分物種(zhong),可拓展至(zhi)尿液(ye)、脑脊液等體液標(biao)本
樣本前處理壓縮(suo)至兩小(xiao)時實驗操作更快